Depuis le milieu du XVIIe siècle, une salle de théâtre a fonctionné dans le palais du Giglio, via Cartoleria, pour la fin de l'année. représentations annuelles et de carnaval des étudiants du Collegio dei Nobili des Jésuites. En 1822, Antonio Brunetti acheta la salle et la loua à des spectacles de marionnettes. La rénovation effectuée quelques années plus tard, en 1830, ne fut pas suffisante pour élever le petit théâtre de forme carrée de quatorze salles au niveau d'un «venale», ce à quoi aspirait le propriétaire. Héritage de ses petits-fils, Cesare et Emilio, le théâtre reprend en 1860 avec l'opéra musical et, après une rénovation, il est inauguré cinq ans plus tard avec un bal masqué. La salle avait deux niveaux de balcons et une galerie soutenue par des colonnes de fer, tandis que les décorations peintes étaient de V. Solmi et G. Lodi. Équipé d'une lucarne mobile et d'autres appareils modernes, tels qu'un système d'éclairage au gaz, le théâtre a connu une saison heureuse et prestigieuse de succès populaire. Dans les années 1870, des opérettes et des concerts de musique populaire y sont organisés. Parmi les illustres patrons de 1878, rappelons le roi Umberto Ier et la reine Margherita, tandis que Crispi et Carducci étaient conférenciers, et Sarah Bernardt a joué dans les pièces La Dame aux camélias et Frou-Frou.
La dédicace du théâtre à l'actrice Eleonora Duse remonte à 1898 après un changement de propriétaire. Les travaux de restauration les plus récents remontent à 1904, à la suite d'un projet de Lorenzo Colliva et de 1940 à 1942, lorsque, avec l'ingénieur Paolo Graziani, le théâtre a adopté la perspective d'aujourd'hui avec de larges balcons remplaçant les galeries. De célèbres compagnies de théâtre et de critiques musicales, ainsi que des chanteurs et des danseurs, continuent de se produire et de plaire au public.